ASXL1缺失对人白血病HEL细胞生物学特性的影响

作者：蒋晓; 肖方楠; 刘怡宁; 张明英; 袁佳佳; 邢文; 周圆^*

来源：中国药理学通报, 2021, 37(08): 1057-1062.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1978.2021.08.005

• ASXL1
• V617F" name="keyword">JAK2V617F
• 骨髓增殖性肿瘤
• HEL细胞
• CRISPR/Cas9
• 芦可替尼

目的本研究以携带JAK2V617F纯合突变的人红白血病细胞HEL为基础,建立ASXL1和JAK2V617F双突变模型,为研究JAK2V617F与ASXL1协同参与MPN疾病进展的机制以及寻找新的药物治疗靶点奠定基础。方法利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术建立ASXL1基因敲除的HEL细胞系,并进行一系列细胞功能实验来验证ASXL1敲除对HEL细胞增殖、克隆形成以及对化疗药物的敏感性的影响。结果成功构建ASXL1基因完全敲除的HEL细胞系(HEL-AKO),模拟JAK2V617F突变与ASXL1基因功能缺失性突变并存。细胞功能实验发现,HEL-AKO细胞较HEL细胞迁移能力变强,增殖能力变慢,细胞周期G2/M期的进程延长,且HEL-AKO细胞的克隆形成能力减弱,药物敏感实验表明,与HEL细胞相比,HEL-AKO细胞对JAK抑制剂芦可替尼产生一定耐受。结论运用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够实现对JAK2V617F突变的人红白血病细胞系HEL细胞系的特定编辑,且ASXL1基因敲除之后会对HEL细胞的生物学功能产生明显影响。

• 单位
  中国医学科学院血液病医院; 北京协和医学院; 中国医学科学院血液学研究所; 实验血液学国家重点实验室