多房棘球绦虫葡萄糖转运蛋白1重组抗原肽构建及原核表达方法建立

作者：**勇; 郭建琴; 李旻; 张晓岩; 汤锋^*; 李润乐^*

来源：中国高原医学与生物学杂志, 2021, 42(02): 113-119.

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2021.02.007

• 多房棘球绦虫
• 葡萄糖转运蛋白1
• 跨膜蛋白
• 表位肽
• 原核表达

目的设计构建及表达纯化多房棘球绦虫葡萄糖转运蛋白1重组抗原肽(GLEP),为后续疫苗研究寻找有效工具。方法用生物信息学软件预测EmGLUT1跨膜结构,将设计构建的表达载体pCzn1-GLEP转化入大肠杆菌真核表达系统,经IPTG诱导、Ni-NTA纯化获得目的蛋白。结果生物信息学软件分析结果表明EmGLUT1为12次跨膜蛋白,用柔性序列GS和KK将筛选后的肽段进行串联,构建重组表达载体pCzn1-GLEP,测序及酶切验证成功后,转化入Artic express大肠杆菌表达系统(表达部位鉴定属于可溶性表达),经Ni-NTA亲和柱层析纯化后获得电泳纯级的GLEP蛋白。结论成功构建GLEP的原核表达系统,并得到纯化重组蛋白,为后续疫苗研究提供有效工具。

• 单位
  青海省人民医院; 青海大学