核受体视黄醇X受体α对高脂喂养的载脂蛋白E基因敲除小鼠Wnt、β-连环蛋白的调节作用及对动脉粥样硬化的影响

作者：祝江; 张美金; 许昌声; 林金秀; 柴大军^*

来源：中华高血压杂志, 2020, 28(12): 1171-1178.

DOI：10.16439/j.cnki.1673-7245.2020.12.015

• 视黄醇X受体
• Wnt蛋白
• β-连环蛋白
• 脂代谢
• 血管平滑肌细胞
• 增殖
• 迁移
• 动脉粥样硬化

目的观察视黄醇X受体(RXR)激动剂蓓萨罗丁(Bex)对高脂喂养的载脂蛋白E(APOE)基因敲除(APOE-/-)小鼠胸主动脉Wnt、β-连环蛋白(β-catenin)的调节作用及对动脉粥样硬化的影响。观察核受体RXRα对血小板源生长因子(PDGF)诱导的平滑肌细胞增殖迁移与Wnt-β-catenin信号转导的关系,探讨核受体RXRα介导Wnt-β-catenin通路对动脉粥样硬化的影响及机制。方法动物实验:8只C57小鼠作为正常对照组,24只APOE-/-小鼠随机分为3组(每组8只):APOE-/-组,APOE-/-+高脂组(高脂喂养APOE-/-小鼠建立动脉硬化模型),APOE-/-+高脂+Bex10组[蓓萨罗丁10 mg/(kg·d)灌胃,干预时间3个月]。检测各组血脂水平,HE染色图像分析测定胸主动脉斑块面积,免疫印迹法检测小鼠胸主动脉Wnt、β-catenin的蛋白表达。细胞实验:培养小鼠胸主动脉平滑肌细胞,(1)分别予PDGF 0、1、3、10、30 ng/mL对平滑肌细胞干预24 h,Western blot方法检测Wnt、β-catenin蛋白表达。(2)PDGF(10 ng/mL)及RXRα激动剂9-顺式维甲酸(9 cis-RA)10-7 mol/L干预24 h,免疫杂交法检测细胞Wnt、β-catenin蛋白水平。(3)PDGF(10 ng/mL)、RXRα激动剂9-cis-RA 10-7 mol/L及β-catenin抑制剂FH535(10-6 mol/L)干预24 h后,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)渗入法测细胞增殖水平,干预4 h,膜迁移法检测细胞迁移。结果与C57组相比,APOE-/-组血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平升高(均P<0.01),APOE-/-+高脂组三者水平进一步增加(P<0.01);APOE-/-+高脂组与APOE-/-+高脂+Bex10组血清总胆固醇、LDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05)。与C57组相比,APOE-/-组胸主动脉Wnt、β-catenin蛋白水平升高,胸主动脉斑块面积显著增加[(64.29±9.87)比0μm2,P<0.05];与APOE-/-+高脂组相比,APOE-/-+高脂+Bex10组Wnt、β-catenin蛋白水平降低,胸主动脉斑块面积降低[(124.09±15.42)比(218.86±15.79)μm2,P<0.05]。与PDGF 0 ng/mL相比,PDGF 10 ng/mL干预后平滑肌细胞Wnt、β-catenin蛋白表达水平增加,细胞增殖与迁移水平增加;与PDGF 10 ng/mL相比,PDGF+9-cis-RA(10-7 mol/L)干预后Wnt、β-catenin蛋白表达降低,平滑肌细胞增殖与迁移水平降低;与PDGF(10 ng/mL)+FH535(10-6 mol/L)相比,PDGF(10 ng/mL)+9-cis-RA(10-7mol/L)干预后平滑肌细胞增殖与迁移水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论RXRα激动剂可通过下调Wnt、β-catenin表达,抑制平滑肌细胞增殖、迁移,降低动脉粥样斑块形成。核受体RXRα可能通过介导Wnt-β-catenin信号通路调节动脉粥样硬化作用。

• 单位
  福建医科大学附属第一医院