摘要
目的建立毛花猕猴桃叶中2α,3α,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(AE)的检测方法并考察提取纯化工艺。方法以AE为对照品,利用高效液相色谱(HPLC)结合蒸发光散射检测器(ELSD),建立AE的含量测定方法;采用单因素及正交试验,考察最佳提取工艺;采用单因素实验,考察最佳纯化工艺。结果建立了稳定可行的AE含量测定方法,并测定了5个不同产地的猕猴桃叶中AE的含量,发现不同产地之间含量差异较大;考察得出最佳提取工艺为:用70%乙醇提取2次,第1次15倍量提取2 h,第2次10倍量提取1 h;最佳纯化工艺为:将提取液浓缩至0.50 g生药/ml,浓缩液静置8 h后,弃去上清液,取沉淀,加入30%乙醇至浓度为0.50 g生药/ml,充分搅拌,再静置8 h,弃去上清液,取沉淀,加入适量石油醚(60-90)充分洗涤。最终得到的AE中间体平均含量为36.25%,从药材到中间体的得率也达到55.96%。结论本实验建立的含量测定方法稳定可行,可用于猕猴桃叶中AE的含量测定;优选出的工艺操作简单可行、重复性好,可推广于工业化大生产。
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