肝细胞生长因子基因转染缺氧培养骨髓间充质干细胞凋亡相关蛋白的影响

作者：蔡文钦; 王隽苼; 苏津自; 江金峰; 姚月娴

来源：中国组织工程研究, 2015, 19(36): 5746-5752.

• 骨髓
• 间质干细胞
• 肝细胞生长因子
• 细胞低氧
• 干细胞
• 骨髓干细胞
• 骨髓间充质干细胞
• 凋亡蛋白
• 缺氧培养
• 细胞迁移
• 福建省自然科学基金

背景:研究已证实肝细胞生长因子基因转染可提高骨髓间充质干细胞移植效果,但其具体机制尚未完全明确。目的:探讨肝细胞生长因子基因转染对缺氧、无血清培养骨髓间充质干细胞c-Met、Bax、Bcl-2、Caspase-3表达及细胞迁移的影响。方法:1贴壁法体外分离、扩增培养骨髓间充质干细胞。用x-gal染色法检测含肝细胞生长因子基因的重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的感染率。2在缺氧、无血清条件下培养0,3,6,9,12 h,采用RT-PCR及Western blot测定骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。3骨髓间充质干细胞缺氧、无血清培养6 h,采用RT-PCR及Western blot测定HGF、c-Met、Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达。4细胞迁移划痕法观察缺氧、无血清培养6 h后肝细胞生长因子转染对骨髓间充质干细胞迁移的影响。结果与结论:1重组腺病毒对骨髓间充质干细胞的转染率与病毒感染复数具有量效关系,病毒感染复数为150时细胞的感染率达96.4%。2随着缺氧时间的延长骨髓间充质干细胞Bax、Bcl-2表达逐渐升高(P<0.05),缺氧6 h时Bax/Bcl-2比值、Caspase-3蛋白达到最小(P<0.05)。3缺氧及无血清培养6 h后,与对照组及空载体组相比,Ad-HGF组HGF、c-Met、Bcl-2表达增高,而Bax、Caspase-3表达下降(P<0.05),对照组与空载体组差异无显著性意义(P>0.05)。4Ad-HGF组骨髓间充质干细胞在缺氧培养6 h后,迁移率比对照组及空载体组高(P<0.05)。结果表明肝细胞生长因子基因转染上调缺氧、无血清培养骨髓间充质干细胞c-Met、Bcl-2表达,下调Bax、Caspase-3表达,增强骨髓间充质干细胞迁移能力。

• 单位
  福建省立医院; 福建医科大学附属第一医院