摘要

本研究采用正交试验法摸索出适于multiple-primer PCR的反应体系中物质成分及其浓度和采用排列组合方法排除干扰引物。结果表明,在10×Buffer(Tris-HCl 100mmol/L和KCl 500mmol/L,pH=9.7)2.5μL、DDT为8mmol/L、dNTP为0.8mmol/L、MgCl2为2.6mmol/L、5%甘油、0.25%二甲亚砜和0.5%甲酰胺,Taq酶10U的25μL的反应体系中,能够成功为总量为32pmol/L的11对互不影响的微卫星引物进行multiple-primer PCR。通过这种方法,多个微卫星位点可以同时进行PCR,极大地提高了种公牛个体识别...