IQGAP1在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞凋亡中的作用及其机制探讨

作者：刘以鹏; 梁伟; 陈星华; 杨倩; 杨英杰; 杨红霞; 丁国华

来源：中华肾脏病杂志, 2014, 30(03): 210-216.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2014.03.010

• 足细胞
• 细胞凋亡
• 血管紧张素Ⅱ
• ras GTP酶激活蛋白质类
• 细胞外调节蛋白激酶1/2

目的研究IQ结构域GTP酶活化蛋白1(1Q domain GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导足细胞凋亡中的作用以及可能的分子机制。方法体外培养条件永生性小鼠足细胞(MPC),以不同浓度(0、10-12、10-10、10-8、10-6mol/L)AngⅡ处理MPC或10-8mol/L AngⅡ刺激不同时间(0、1、3、6、12、24 h),采用流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光、Western印迹法检测IQGAP1的表达及分布。IQGAP1 siRNA转染以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路(包含p38、JNK和ERK1/2 3条主要通路)抑制剂SB202190(10μmol/L)、SP600125(25μmol/L)或U0126(10μmol//L)预处理MPC后。分别检测MAPK信号蛋白磷酸化水平及细胞凋亡率,并采用免疫共沉淀法研究IQGAPI与ERK1/2结合水平的变化。结果(1)AngⅡ可以诱导足细胞凋亡,且凋亡率随着刺激时间和刺激浓度的增加而进一步增加。(2)正常足细胞IQGAP1主要分布于细胞膜和胞质,随AngⅡ刺激浓度和刺激时间的增加,胞膜和胞质IQGAP1表达逐渐增高,且随剂量和时间增高。(3)SB202190、SP600125或U0126分别预处理足细胞,可显著降低AngⅡ诱导的足细胞凋亡(P<0.05).但不影响IQGAP1蛋白表达。(4)IQGAP1 siRNA转染足细胞显著下凋ERK1/2磷酸化水平(P<0.05).降低IQGAP1与ERK1/2结合量(P<0.05),并抑制AngⅡ诱导的细胞凋亡(P<0.05),但对于p38以及JNK通路无显著影响。结论IQGAP1通过ERK1/2 MAPK信号通路介导AngⅡ诱导的足细胞凋亡。

• 单位
  武汉大学人民医院