橡胶树HbSnRK2.6家族基因的克隆、原核表达及纯化

作者：王雪; 吴群珠; 袁红梅^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(09): 2828-2834.

DOI：10.13271/j.mpb.017.002828

• 巴西橡胶树
• 冷胁迫
• SnRK2.6
• 原核表达

低温是重要的环境胁迫因子,严重影响中国橡胶树的分布及胶乳的产量。在拟南芥中,低温能够激活蛋白激酶SnRK2.6,并提高植物耐寒性能,但橡胶树中的SnRK2.6至今未被克隆。本研究以橡胶树7-33-97为材料,从cDNA中扩增出两个SnRK2.6基因(HbSnRK2.6A和HbSnRK2.6B)。氨基酸序列比对分析表明,Hb SnRK2.6A和HbSnRK2.6B与其他物种中的SnRK2.6存在较高的同源性。将HbSnRK2.6A及HbSnRK2.6B构建到原核表达载体上,在E. coli (DE3)中诱导并纯化HbSnRK2.6重组蛋白,结果表明HbSnRK2.6A和HbSnRK2.6B的最佳诱导条件是:16℃诱导16 h,IPTG浓度为0.6 mmol/L。最终我们成功在大肠杆菌中表达并得到了大量橡胶树中的蛋白激酶SnRK2.6。

• 单位
  海南大学