pCMV-Myc-MyD88重组质粒构建及其在293T细胞中的表达

作者：潘洁; 邓延梅; 何雅军; 刘志河; 吕霞; 沈雁; 宋慧东; 舒建昌

来源：广东医学, 2016, 37(11): 1634-1636.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2016.11.011

• My D88
• 重组质粒
• 293T细胞

目的构建髓样分化因子88(My D88)真核表达质粒,并检测其在293T细胞中的表达,为进一步研究应用奠定实验基础。方法从大鼠肝星状细胞株T-6中提取总RNA,应用PCR技术扩增My D88基因编码序列片段,克隆入真核表达载体p CMV-Myc质粒中,对重组质粒经酶切和测序鉴定后,以钙离子转染法转染至293T细胞中,采用Western blot的方法检测My D88蛋白的表达,以观察转染及表达效果。结果酶切及测序结果证明p CMV-Myc-My D88重组质粒的DNA序列正确,将其转染至293T细胞后,My D88蛋白表达明显增加。结论p CMV-Myc-My D88重组质粒构建成功,并能在293T细胞中表达,为进一步研究针对My D88分子的疾病治疗及其生物学功能奠定了实验基础。

• 单位
  广州市红十字会医院; 广州市第十二人民医院; 暨南大学