摘要
为快速有效检测烟草靶斑病菌,以烟草靶斑病菌beta-tubulin基因序列保守区域为靶标位点,设计重组酶介导扩增技术(Recombinaseaided amplification,RAA)引物,结合侧流层析试纸条(Lateral flow dipstick,LFD),建立烟草靶斑病菌快速检测体系并进行优化。结果表明,LFD-RAA检测体系在39℃恒温条件下反应30min即可完成RAA扩增,并具有较高的特异性,其检测极限值为100 fg/μL,与普通PCR检测灵敏度相当。对检测体系优化确定检测扩增的最优时间为20~35 min、扩增温度为31~39℃。LFD-RAA检测体系可应用于烟草上烟草靶斑病菌的快速检测。
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单位湖南农业大学; 湖南省烟草公司郴州市公司