肥胖MC4R重组腺病毒表达载体的构建及鉴定

作者：王玉彬; 吕金钢; 苏荣健; 王光川; 巴彩凤

来源：山东医药, 2011, (15): 45-47.

• 肥胖
• 黑素皮质素受体-4
• 同源重组
• 腺病毒载体

目的构建黑素皮质素受体-4(MC4R)重组腺病毒表达载体,为肥胖症的基因治疗研究奠定基础。方法 PCR扩增犬MC4R目的基因后与T载体连接,双酶切鉴定正确的T-A载体获得具有黏性末端的MC4R目的基因;将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,构建穿梭载体pShuttle-CMV/MC4R;PmeⅠ单酶切pshuttle-CMV/犬MC4R后,转化到含pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,采用细菌内同源重组法构建腺病毒载体pAdeasy-1/pshuttle-CMV/MC4R;筛选阳性克隆子;PacⅠ酶切鉴定。结果线性化的pShuttle-CMV/MC4R转化含pAdeasy...

• 单位
  锦州医科大学; 辽宁医学院附属第一医院