干扰Twist基因对胰腺癌PANC1细胞糖酵解的影响及机制研究

作者：黄驿胜; 王竞枫; 林枫; 李林立; 叶启文; 林峰; 张代场

来源：中华胰腺病杂志, 2018, 18(03): 185-188.

• 胰腺肿瘤
• 糖酵解
• 细胞增殖
• Twist

目的观察干扰Twist基因表达对胰腺癌PANC1细胞糖酵解的影响,探讨其可能机制。方法设计并合成靶向Twist的siRNA(siRNA-Twist),采用脂质体法转染胰腺癌PANC1细胞,以非特异性siRNA(siRNA-NC)作为阴性对照,以未转染细胞作为空白对照。采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞Twist mRNA和蛋白表达以及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达;MTT法检测细胞增殖能力;检测糖酵解限速酶(丙酮酸激酶、己糖激酶)活性及培养上清中乳酸含量。结果对照组、siRNA-NC组和siRNA-Twist组Twist mRNA表达量分别为1.00±0.09、1.01±0.08、0.36±0.02,蛋白表达量分别为0.41±0.05、0.42±0.04、0.12±0.06,siRNA-Twist组mRNA和蛋白表达量均显著低于对照组和siRNA-NC组,差异有统计学意义(P值均<0.05);细胞存活率分别为(100.02±9.36)%、(100.01±10.25)%、(59.32±7.26)%,siRNA-Twist组显著低于对照组和siRNA-NC组,差异有统计学意义(P值均<0.05);丙酮酸激酶活性分别为(0.73±0.05)、(0.72±0.08)、(0.43±0.05)U/mg,己糖激酶活性为(4.98±0.48)、(4.96±0.52)、(2.54±0.21)U/mg,乳酸含量分别为(20.36±2.61)、(20.64±3.05)、(9.48±1.09)mmol/L;p-Akt/Akt比值分别为0.65±0.04、0.63±0.07、0.25±0.04,siRNA-Twist组均较对照组和siRNA-NC组显著降低,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论干扰Twist基因表达能够抑制胰腺癌细胞增殖和糖酵解途径,其作用机制可能与Akt信号通路有关。

• 单位
  福建医科大学附属闽东医院