大蒜素通过JAK2/STAT3信号通路改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化

作者：甘林望; 李乾程; 高利超; 刘琦; 李莹; 王玉洁; 欧三桃^*

来源：中国比较医学杂志, 2023, 33(11): 39-47.

• 人腹膜间皮细胞
• EMT
• 大蒜素
• JAK2/STAT3信号通路

目的 探讨大蒜素改善高糖诱导的人腹膜间皮细胞-间充质转化的相关机制。方法 培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells, HPMCs)后将其进行两次分组，分组1:(1)对照组；(2)8.5 mmol/L D-葡萄糖诱导组(8.5 mmol/L DG组);(3)17 mmol/L D-葡萄糖诱导组(17 mmol/L DG组);(4)34 mmol/L D-葡萄糖诱导组(34 mmol/L DG组);(5)68 mmol/L D-葡萄糖诱导组(68 mmol/L DG组)。其中除对照组外，其余组分别用8.5、17、34、68 mmol/L的D-葡萄糖诱导48 h。分组2:(1)对照组；(2)34 mmol/L D-葡萄糖诱导组(HG组);(3)34 mmol/L D-葡萄糖+低剂量大蒜素诱导组(AL-L组);(4)34 mmol/L D-葡萄糖+中剂量大蒜素诱导组(AL-M组);(5)34 mmol/L-葡萄糖+高剂量大蒜素诱导组(AL-H组);(6)34 mmol/L D-葡萄糖+JAK2抑制剂诱导组(JAK2组)。其中HG组用34 mmol/L的D-葡萄糖诱导48 h, AL-L组、AL-M组、AL-H组用34 mmol/L的D-葡萄糖预处理6 h后分别用10、20和40 ng/mL大蒜素诱导48 h, JAK2组加入1μmol/L AG490预处理6 h后用34 mmol/L的D-葡萄糖诱导48 h。ELISA检测HPMCs上清的IL-6、TNF-α和IL-1β的含量；CCK-8检测细胞增殖并观察形态；Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、MCP-1、p65、p-p65蛋白的表达情况。结果 与对照组相比，高糖诱导组HPMCs的相对存活率明显降低(P<0.01),细胞形态表现异常，促进上皮细胞-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)发生的α-SMA、N-cadherin和Vimentin表达明显上调，抑制EMT发生的E-cadherin蛋白表达明显下调，JAK2/STAT3信号通路被激活从而导致EMT的发生(P<0.01);而大蒜素能明显促进高糖诱导后的HPMCs增殖，恢复异常的细胞形态，调节与EMT发生的相关蛋白水平从而改善HPMCs的上皮间质转分化；与高糖诱导组相比，大蒜素处理组HPMCs的促炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α明显降低，促炎症蛋白p-p50和MCP1表达明显下调，表明大蒜素能改善EMT引起的炎症。结论 大蒜素可通过抑制JAK2/STAT3信号通路调节EMT发生的标志蛋白、炎症信号蛋白及炎症因子水平从而改善高糖诱导的EMT及炎症。

• 单位
  西南医科大学