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摘要
目的：蓬佩病是一种由酸性α-葡糖苷酶(GAA)缺乏引起的溶酶体糖原贮积症，病理特征是糖原在心脏、骨骼肌和中枢神经系统中累积。基因治疗有望成为治疗蓬佩病的突破性手段。采用AAV9载体在蓬佩病模型小鼠体内介导GAA基因转移，评估转基因干预后小鼠体内GAA酶活力变化、组织糖原累积及病理改变。方法：采用AAV9载体携带密码子优化的GAA基因(coGAA),通过杆状病毒生产工艺包装AAV病毒载体rAAV9-coGAA,分别以1.1×1013 vg/kg、3.0×1013 vg/kg、1.2×1014 vg/kg的剂量静脉单次注射给予成年蓬佩病模型小鼠，以3.0×1013vg/kg的剂量静脉单次注射给予老龄蓬佩病模型小鼠。到达试验终点后安乐死小鼠，使用荧光分光光度法测定GAA酶活力、PAS染色观察糖原累积、HE染色检查病理变化。结果：成年模型小鼠给药5周后，各个组织能够广泛表达具有活性的GAA,其中心脏、肝脏表达水平较高，脑和脊髓表达水平较低。转基因干预后心肌、骨骼肌与脑中的糖原含量下降，心肌、骨骼肌的空泡样变性显著减少。老龄小鼠治疗后，组织酶活力与模型小鼠相比显著提升，心肌的空泡样变性和炎细胞浸润减少，但骨骼肌的病理改善有限。结论：静脉单次注射rAAV9-coGAA在蓬佩病模型小鼠中能够提升GAA酶活力，减少糖原累积并改善病理，治疗效果呈剂量依赖，对老龄小鼠也有一定治疗效果。为AAV9静脉递送GAA基因治疗蓬佩病的临床应用奠定了基础。
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