基因枪法介导的转KN2基因小麦的获得及鉴定

作者：周鹏; 池青; 吕金洋; 刘香利; 赵惠贤

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2014, 42(01): 83-88.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2014.01.028

• 小麦
• 基因枪法
• 共转化法
• KN2基因

【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织,经过除草剂(Phosphinothricin,草丁膦)筛选和愈伤组织分化获得再生植株,并对得到的再生小麦植株进行PCR检测。【结果】采用基因枪法共轰击小偃22的幼胚愈伤组织1 680个,共获得再生植株17株,移栽到花盆中成活15株;根据目标基因序列设计特异引物,对成活的小麦植株进行PCR检测,结果表明获得含有bar基因和KN2基因的转基因阳性植株分别为6株和4株,转化率分别为0.36%和0.24%,bar和KN2的共转化率为0.24%。【结论】KN2基因成功地转入到小麦品种小偃22中。

• 单位
  西北农林科技大学; 分子生物学国家重点实验室; 生命科学学院