ACTHR在介导血管紧张素II和氯化钾对醛固酮分泌调控中的实验研究

作者：胡东亮^*; 刘同族; 倪栋; 王行环

来源：中华内分泌外科杂志, 2016, 10(04): 313-316.

• 促肾上腺皮质激素受体
• H295R细胞
• 血管紧张素II
• 氯化钾
• 醛固酮合成酶
• 原发性醛固酮增多症

目的研究血管紧张素II(AT-II)和氯化钾刺激人肾上腺皮质癌H295R细胞后醛固酮合成酶(CYP11B2)mRNA及醛固酮激素的改变情况,并探讨促肾上腺皮质激素受体(ACTHR)在介导该反应中的作用。方法用慢病毒包装的ACTHR高表达载体感染H295R细胞作为实验组,空载体病毒转染组细胞为对照组。应用免疫印迹Western blot和荧光定量PCR法验证ACTHR表达情况,分别用100 nmol/L AT-II及16 mmol/L氯化钾刺激各组细胞,刺激24 h后测定CYP11B2 mRNA表达水平,对比2组细胞CYP11B2 mRNA增幅情况。用ELISA试剂盒测定醛固酮激素的含量,对比2组细胞醛固酮增幅情况。结果实验组细胞ACTHR在蛋白水平和mRNA水平分别增加2.4倍和18倍(P<0.05)。AT-II刺激24 h后实验组细胞CYP11B2 mRNA表达水平较对照组细胞高1.7倍,2组细胞醛固酮激素水平分别为(121.98 ± 8.31)ng/L和(104.05 ± 6.88)ng/L,前者增幅为后者的2.06倍(P<0.05);氯化钾刺激各组细胞24 h后,实验组细胞CYP11B2 mRNA表达水平较对照组细胞高19.2倍,2组细胞醛固酮激素水平分别为(137.67±10.35)ng/L和(104.05±6.88)ng/L,前者增幅为后者的3.13倍(P<0.05)。结论 ACTHR高表达可增加醛固酮对AT-II和氯化钾刺激的敏感性,有望成为研究原发性醛固酮增多症重要突破口。

• 单位
  武汉大学中南医院