调控自噬对放射诱导多倍体宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

作者：周丽; 阎英; 孟繁杰; 赵松; 刘硕; 孙凌燕; 于卉影^*

来源：中国临床实用医学, 2023, 14(01).

• 宫颈癌
• 多倍体肿瘤细胞
• 自噬
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的研究调控自噬对放射诱导多倍体宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法人宫颈癌细胞系Hela购自中国科学院上海细胞库。将未经照射的宫颈癌细胞系Hela作为对照组, 经7 Gy剂量X线照射的Hela细胞、氯喹(50 μmol/L)预处理1 h后经7 Gy剂量X线照射的Hela细胞分别记为7 Gy组和7 Gy+氯喹组。流式细胞术检测细胞倍性, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖率, 划痕实验和Transwell侵袭试验分别检测细胞迁移和侵袭能力, Western blot检测细胞自噬、周期相关蛋白和上皮间质转化相关标志物的表达水平。结果倍性分析结果显示, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的多倍体细胞亚群(DNA含量>4 N)比例[(5.30±0.46)%、(32.27±2.48)%、(26.37±0.90)%]比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示, 培养24 h后, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的细胞增殖率[(97.50±2.43)%、(73.27±5.86)%、(55.70±13.05)%]比较, 差异有统计学意义(P<0.05);培养48 h后, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的细胞增殖率[(158.84±1.62)%、(113.64±7.02)%、(75.42±4.33)%]比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示, 划痕24 h后, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的划痕愈合面积百分率[(68.68±1.73)%、(51.79±2.53)%、(40.40±8.81)%]比较, 差异有统计学意义(P<0.05);划痕48 h后, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的划痕愈合面积百分率[100%、(77.11±5.96)%、(46.611±0.82)%]比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的侵袭细胞数[(184.33±20.03)个、(73.00±11.14)个、(24.33±3.51)个]比较, 差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示, 对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅱ/自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅰ、P-cdc25c(ser216)、cdc25c(5H9)、E钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达水平比较, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结论调控自噬能够抑制多倍体肿瘤细胞的产生, 降低放射诱导宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力, 提示自噬可能在宫颈癌细胞的放射抵抗中起着重要的作用。