利用LC-MS/MS法解析化学修饰型胰岛素类似物的氨基酸序列

作者：胡馨月; 丁晓丽; 孙悦; 秦希月; 张慧; 李晶^*; 梁成罡^*

来源：中国新药杂志, 2023, 32(03): 301-310.

DOI：10.3969/j.issn.1003-3734.2023.03.013

• 脂肪侧链修饰型胰岛素类似物
• 德谷胰岛素
• 地特胰岛素
• LC-MS/MS法
• 氨基酸序列定位
• 酶切

目的:德谷胰岛素和地特胰岛素是以长链脂肪酸化学修饰为代表的第3代胰岛素类似物，有必要建立专属性强、灵敏度高的LC-MS/MS法测定化学修饰型胰岛素类似物的氨基酸序列。方法:氨基酸序列测定方法的色谱参数为ACQUITY UPLC peptide BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm, 300?),流动相A为0.1%甲酸/水溶液，流动相B为0.1%甲酸/乙腈溶液，梯度洗脱，流速0.3 mL·min-1;质谱参数为MSE采集模式，碰撞能量为30～40 eV。结果:德谷胰岛素和地特胰岛素序列覆盖率良好，化学修饰位点的碎片离子y1&可检出，中高强度离子的离子强度RSD在15%之内，可有效区分与其他未修饰胰岛素的序列。结论:建立了重复性好、专属性强和耐用性好的脂肪侧链修饰型胰岛素类似物氨基酸序列LC-MS/MS方法，为该类产品序列结构的研究方法提供了借鉴意义。

• 单位
  吉林大学; 中国食品药品检定研究院