摘要
目的预测并筛选与细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(CIAPIN1)基因3′非翻译区(3′UTR)高度匹配的目标miRNA,并初步探讨乳腺癌亲本细胞株及耐药细胞株中CIAPIN 1蛋白及目标miRNA表达间的靶向关系。方法应用TargetScan、PicTarmi、miRanda数据库预测CIAPIN1基因3′UTR可能存在的种子结合位点miRNA,并根据文献筛选出目的miRNA。Western blot法检测易成瘤的乳腺癌细胞株MCF-7、三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231、人表皮生长因子2(HER2)高表达的乳腺癌细胞株MDA-MB-453及相对应的3种耐紫杉醇的乳腺癌细胞株MCF-7/Tax、MDA-MB-231/Tax、MDA-MB-453/Tax中CIAPIN1蛋白的表达情况。实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测乳腺癌亲本细胞及其耐药细胞中目的miRNA的表达情况。结果预测并筛选出目标miRNA,分别为miRNA143、miRNA571、miRNA647。Western blot法检测示,与乳腺癌亲本细胞相比,其耐药细胞中CIAPIN1蛋白相对高表达,差异有统计学意义[MCF-7/Tax比MCF-7、MDA-MB-231/Tax比MDA-MB-231、MDA-MB-453/Tax比MDA-MB-453的表达量(相对于内参GAPDH)分别为:0.80比0.21、0.70比0.31、1.00比0.35,均P<0.05]。PCR法检测示,与乳腺癌亲本细胞相比,耐药细胞中miRNA143、miRNA571、miRNA647相对低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论预测并筛选出的与CIAPIN1基因3′UTR区存在种子结合位点的miRNA有miRNA143、miRNA571、miRNA647,各miRNA在耐药细胞株中低表达,而CIAPIN1蛋白相对高表达,提示这些miRNA可能通过靶向调控CIAPIN1基因参与了乳腺癌的多药耐药过程。
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