DNA疫苗的不同构象在体内外表达差异研究

作者：赵晨燕; 黄维金; 刘强; 王佑春

来源：药物分析杂志, 2013, (08): 1275-1279.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2013.08.019

• 拓扑形式
• 构象
• 超螺旋
• 荧光素酶
• 活体成像技术
• 疫苗质量控制 topological form
• conformation
• supercoil
• luciferase
• in vivo imaging technology
• vaccine quality control

目的:研究DNA疫苗构象对体内和体外表达的影响。方法:分别构建绿色荧光蛋白表达质粒(pcDNA3.1-EGFP)和萤火虫荧光素酶表达质粒(pDRVISV1.0-Fluc),对其存在的3种拓扑形式(包括超螺旋、线性、闭环切刻等)和反复冻融状态对表达效率的影响进行分析,前者用脂质体介导转染293FT细胞,用流式细胞仪检测EGFP的表达情况;后者通过接种BALB/c小鼠,用活体成像技术监测荧光素酶的表达情况。结果:对pcDNA3.1-EGFP质粒,流式细胞仪检测其转染293FT细胞48 h后显示,4种处理组的质粒表达EGFP的效率和荧光强度有所差异,依次为新鲜制备质粒(89.76%,2682.68)...

• 单位
  中国食品药品检定研究院; 吉林大学