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摘要
为探究围产期奶牛亚临床酮病血清中生化指标的变化特征，本研究选取2～4胎次荷斯坦围产期奶牛45头，分别在分娩前7 d、分娩当天晨饲前经尾根静脉采血，以血酮检测值<1.2 mmol/L为健康组，≥1.2 mmol/L为酮病组。采用ELISA试剂盒测定分娩前7 d、分娩当天、分娩后7 d、14 d健康组和酮病组奶牛血液中的生化指标。结果显示，酮病组奶牛分娩前7 d和分娩当天血清中皮质醇含量显著高于健康组(P<0.05)；并且酮病组奶牛分娩前7 d血清中β-羟丁酸(BHBA)、高密度脂蛋白(HDL-C)含量显著高于健康组(P<0.05)；酮病组奶牛分娩前后血清中葡萄糖(Glu)、甘油三脂(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL-C)、游离脂肪酸(FFA)含量较健康组虽无显著差异，但均高于健康组。分别以0、1×10-7mmol/L、1×10-8mmol/L、1×10-9mmol/L浓度的糖皮质激素(GC)刺激原代分离培养的犊牛肝细胞，作用0、1 h、3 h、6 h、24 h后采用荧光定量PCR检测肝细胞中糖异生相关受体及其相关酶编码基因的相对转录水平，并以皮尔森相关系数对糖异生相关受体及其相关酶编码基因的转录水平进行相关性分析。q PCR结果显示：高浓度GC促进原代犊牛肝细胞中糖皮质激素受体(GR)NR3CI的转录水平，低浓度GC促进盐皮质激素受体(MR) NR3C2的转录水平。糖异生相关限速酶PC、PEPCK-C、PCK2、11β-HSD1、11β-HSD2编码基因的相对转录水平随GC浓度和其作用时间而变化。皮尔森(Pearson)相关性分析结果显示：PC、PCK2、11β-HSD1基因的相对转录水平与NR3C1极显著相关(P<0.01),PEPCK-C、11β-HSD1、11β-HSD2与NR3C2的相对转录水平显著相关(P<0.05)。上述结果表明酮病奶牛分娩前GC水平升高，而GC可能通过结合其受体GR/MR提高奶牛肝细胞中糖异生关键酶PC、PEPCK-C、PCK2、11β-HSD1和11β-HSD2编码基因m RNA的转录，从而促进糖异生作用。本研究为酮病奶牛体内糖脂代谢相关激素GC的内分泌调节作用及其分子机制和GC的临床应用奠定实验基础。
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