肾缺血再灌注致肺损伤关键基因Alox5ap的筛选及其表达与功能验证

作者：欧阳秀芳; 赵宁; 付尚淼; 孙智坚; 钱克俭; 陶文强^*

来源：南昌大学学报(医学版), 2023, 63(06): 8-14.

DOI：10.13764/j.cnki.ncdm.2023.06.002

• 肺损伤
• 肾缺血再灌注
• 生物信息学
• 花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白
• 动物
• 实验
• 大鼠

目的 筛选肾缺血再灌注(RIR)致肺损伤的关键基因并对其表达与功能进行验证。方法 GEO数据库下载RIR致肺损伤数据集GSE6730,利用生物信息学方法筛选关键基因。SD大鼠按照随机数字表法分为2组：假手术组(Sham组)和RIR组，每组6只；HE染色观察2组大鼠肺组织病理形态；qRT-PCR检测2组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6、IL-18及花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白(Alox5ap) mRNA的表达。常规培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN,将其分为Control组、LPS组(LPS处理)、LPS+si-NC组(转染si-NC联合LPS处理)、LPS+si-Alox5ap组(转染si-Alox5ap联合LPS处理)、LPS+MK-886组(LPS联合抑制剂MK-886处理);qRT-PCR检测各组TNF-α、IL-6、IL-18的mRNA表达。结果 Alox5ap为RIR致肺损伤的关键基因。与Sham组比较，RIR组肺组织见明显损伤，TNF-α、IL-6、IL-18及Alox5ap mRNA表达均增加(P<0.05)。与Control组比较，LPS组TNF-α、IL-6、IL-18 mRNA表达均升高(P<0.05);与LPS+si-NC组比较，LPS+si-Alox5ap组的TNF-α、IL-6、IL-18的mRNA表达均降低(P<0.05);与LPS组比较，LPS+MK-886组的TNF-α、IL-6、IL-18的mRNA表达均降低(P<0.05)。结论 成功筛选RIR致肺损伤关键基因Alox5ap, RIR致肺损伤后肺组织中Alox5ap表达升高；下调Alox5ap表达可减轻LPS诱导肺损伤的炎症因子表达。

• 单位
  南昌大学第一附属医院