斑马鱼tbx2b调控心脏房室间隔发育的功能研究

作者：赵霞; 朱哲; 祖尧^*

来源：中国生物工程杂志, 2021, 41(08): 1-7.

DOI：10.13523/j.cb.2103060

• tbx2b
• 心脏发育
• 房室间隔
• CRISPR

tbx2是早期心脏发育的关键基因。为进一步探究其对房室间隔(AVC)发育的影响,研究利用CRISPR/Cas9介导的基因敲除技术,成功构建了斑马鱼tbx2b突变体。通过T7E1酶切对其F0进行敲除效率检测,结果显示平均敲除效率约为57.5%。F1进一步筛选获得tbx2b杂合突变体,测序结果显示突变类型为11 bp碱基缺失的移码突变。tbx2b杂合子内交获得纯合子,tbx2b纯合突变体在5 dpf死亡并出现早期心脏环化异常表型。斑马鱼整胚原位杂交实验显示在3 dpf tbx2b纯合突变体中,心脏腔室分化特异性标志基因nppa、nppb表达上调并异位表达在AVC,而AVC发育关键基因has2的表达消失。高效构建tbx2b突变体并初探其对下游基因的影响,为后续深入研究tbx2b对心脏AVC发育的作用奠定了基础,同时加深了人们对早期心脏调控网络的认识。

• 单位
  上海海洋大学; 国家水生动物病原库