糖原合成酶激酶3活性抑制通过激活PPARα对急性肝衰竭小鼠发挥保护性作用

作者：时红波; 时红林; 张向颖; 陈德喜; 段钟平; 任锋^*

来源：中华肝脏病杂志, 2017, 25(03): 211-216.

• 肝功能衰竭
• 脂多糖类
• 炎症
• 糖原合成酶激酶3
• 过氧化物酶体增殖物激活受体α
• D-氨基半乳糖

目的用D-氨基半乳糖/脂多糖(D-GalN/LPS)诱导的小鼠急性肝衰竭模型, 探讨糖原合成酶激酶3(GSK3)β和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α信号通路在急性肝衰竭中的作用及其机制。方法以C57BL/6小鼠为研究对象, 腹腔注射D-GalN/LPS建立小鼠急性肝衰竭模型。用SB216763抑制GSK3β活性, 用PPARα siRNA抑制PPARα表达。Western blot检测小鼠中PPARα蛋白表达情况。观察小鼠肝组织病理变化情况以评价肝脏损伤情况, 检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)评价肝脏功能。实时荧光定量PCR检测肝组织中肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)-1β、IL-12p40 mRNA和PPARα基因表达水平。多组样本均数的比较采用单因素方差分析, 方差齐者用LSD检验, 方差不齐者用Games-Howell法。结果在D-GalN/LPS诱导的肝衰竭小鼠中, 抑制GSK3β活性促进了PPARα的mRNA(0.29±0.05与0.17±0.02, F = 13.18, P < 0.01)和蛋白(0.79±0.05与0.15±0.04, F = 301.36, P < 0.01)表达水平。在D-GalN/LPS诱导的急性肝衰竭小鼠中, 抑制GSK3β活性减轻了小鼠肝脏出血、炎症和坏死, 降低了血清肝功能指标ALT(572.0±127.8与1 627.0±412.4, F = 25.16, P < 0.01)、AST(479.2±229.2与1 359.0±534.8, F = 12.96, P < 0.01)水平, 也降低了肝组织中炎症因子TNFα(F = 32.17, P < 0.01)、IL-1β(F = 11.57, P < 0.01)、IL-12p40 (F = 14.17, P < 0.01)mRNA表达水平。抑制PPARα表达逆转了GSK3β活性抑制带来的肝保护性作用, 表现在肝脏出血、炎症和坏死加重, 血清肝功能指标ALT(1 433.0±464.0与708.7±196.2, F = 25.16, P < 0.01)、AST(1 361.0±583.2与352.7±177.4, F = 12.96, P < 0.01)水平升高, 肝组织中炎症因子TNFα(F = 32.17, P < 0.01)、IL-1β(F = 11.57, P < 0.01)、IL-12p40(F = 14.17, P < 0.01)mRNA表达水平升高。结论在D-GalN/LPS诱导的小鼠急性肝衰竭中, GSK3β-PPARα-炎症因子通路是重要的分子信号通路之一, 抑制GSK3β活性可能通过激活PPARα抑制炎症因子对急性肝衰竭小鼠发挥保护性作用。

• 单位
  北京市肝病研究所; 首都医科大学附属北京佑安医院