KISS-1基因表达物对骨肉瘤细胞凋亡和自噬调控机制的研究

作者：刘晓强; 吴华明; 谢惠; 姚熙

来源：中外医疗, 2018, 37(10): 7-10.

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2018.10.007

• KISS-1
• 骨肉瘤
• P53
• CytC
• P62
• Beclin1

目的该研究就KISS-1基因表达物在骨肉瘤细胞中的凋亡和自噬作用进行比较分析,探讨KISS-1基因表达对骨肉瘤细胞凋亡和自噬的调控机制。方法于2016年4月—2017年1月在该院细胞实验室分别向K7M2骨肉瘤细胞培养中分别加入KISS1蛋白Kp(Kisspeptin)或抗Kp蛋白,将其对应分为Kp组和抗Kp蛋白组,并分别与普通培养的K7M2细胞形成的控制组进行比较,待细胞培养24,48、72、96 h后,每组各时间点选取6孔对数生长期的细胞纳入实验观察,MTT观察细胞增殖情况,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用RT-PCR检测细胞培养72 h后凋亡标记物(P53、Cyt C)及自噬标记物(P62、Beclin1)的m RNA表达水平。结果细胞培养96 h后,对照组细胞增殖率均数百分比由(0.660±0.075)%变为(1.330±0.214)%,Anti-Kp组细胞增殖率均数百分比由(0.677±0.093)%变为(1.465±0.194)%,而Kp组细胞增殖率均数百分比由(0.530±0.083)%变为(0.328±0.044)%,凋亡率均数百分比由(24.53±3.65)%变为(39.75±8.32)%。Anti-Kp组增殖率显著高于对照组(P<0.05)。细胞接种培养72 h后,对照组的P53和Cyt C的m RNA表达水平均数为(0.213±0.045)和(0.220±0.046),Kp组P53和Cyt C的m RNA表达量均数为(0.393±0.107)和(0.509±0.145)。同时,P62和Beclin1在控制组的m RNA表达量均数为(0.169±0.055)和(0.120±0.043),而在Kp组P62和Beclin1m RNA表达量均数为(0.426±0.120)和(0.357±0.103)。P62和Beclin1的m RNA表达水平在Kp组最高,Anti-Kp组最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KISS-1基因表达物具有促进细胞凋亡和自噬来控制骨肉瘤细胞增殖的作用。