细胞自噬调控颅内动脉瘤血管平滑肌细胞表型转化的体外研究

作者：袁广胜; 吴海东; 陈胜利; 李小梅; 邵楠; 王纪斌; 张婷

来源：中国免疫学杂志, 2019, 35(11): 1337-1353.

• 颅内动脉瘤
• 流体切应力
• 血管平滑肌细胞
• 表型转化
• 自噬

目的:探讨流体切应力(SS)对体外大鼠脑血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响及相关自噬调控机制。方法:运用倒置相差显微镜和免疫细胞化学方法对大鼠VSMCs进行鉴定后,并给予15. 28 dyne/cm2流体切应力冲击VSMCs6、12、24 h。为探讨自噬在VSMCs表型转化中作用,于冲击前6 h给予自噬激动剂(Rapa)和抑制剂(3-MA)干预。实验分为control组、SS组、SS+3-MA组和SS+Rapa组。于冲击后6、12、24 h采用Real-time PCR法检测VSMCs收缩表型及合成表型的标志基因的表达水平;免疫细胞化学和免疫印迹法检测自噬标志蛋白LC-3和Beclin-1的定性定量表达。结果:与control组相比,SS组中VSMCs收缩表型标志基因α-SMA及SM-22a的表达显著下调(P<0. 05);合成表型标志基因MMP-2和TNF-α的水平显著上调(P<0. 05);自噬蛋白LC-3和Beclin-1的表达显著增强(P<0. 05);与SS组相比,自噬抑制剂3-MA可显著逆转流体切应力诱导的VSMCs表型转化(P<0. 05),与之相反,自噬激动剂Rapa可促进VSMCs的表型转化(P<0. 05)。结论:流体切应力可能通过激活细胞自噬诱导体外VSMCs的表型转化,进而参与颅内动脉瘤的发生发展。