摘要
目的:观察电针配伍穴位对急性脊髓损伤(SCI)后大鼠运动功能的影响及脊髓神经元缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达变化,探讨电针促进大鼠运动功能恢复作用及其可能机制。方法:108只雌性SD大鼠,随机分为假手术组36只(Sham组)、模型组36只(SCI组)和电针组36只(SCI+EA组)。以T10为中心,用HI—0400脊髓打击器构建大鼠SCI模型;Sham组只去除椎板,不损伤脊髓。SCI+EA组术后1d开始电针干预,穴位配伍为大椎、至阳、命门、夹脊、足三里、三阴交,每日一次,每次30min,干预28d。于损伤后1d、3d、7d、14d、21d、28d 6个时间点,采用BBB评分评估大鼠后肢运动功能变化;HE染色观察损伤脊髓节段组织结构变化;免疫荧光法、Western Blot法检测各组大鼠脊髓组织中HIF-1α、VEGF蛋白定位及表达变化。结果:(1)BBB运动功能评分SCI+EA组14d后明显升高,与SCI组比较有差异(P<0.05);(2)HE染色Sham组脊髓结构完整,神经元形态清晰。SCI组3d有打击空洞,出血。7d、14d可见坏死神经元,小胶质细胞增多;21d、28d神经元数量减少。SCI+EA组电针3d后,脊髓打击处可见空洞、出血,7d后变性的神经元细胞结构逐渐清楚,细胞核清晰,核膜完整,坏死细胞计数较SCI组少(P<0.05);(3)免疫荧光显示HIF-1α、VEGF定位于运动神经元,损伤后7d荧光强度达到高峰,SCI+EA组荧光强度在各时间点均强于SCI组(P<0.05),Sham组荧光强度低于SCI组与SCI+EA组(P<0.05);(4)Western Blot结果显示,损伤后7d SCI+EA组HIF-1α、VEGF蛋白表达明显升高,多于SCI组(P<0.05),14d后各对应时间点SCI+EA组蛋白表达均高于SCI组(P<0.05)。结论:电针可以促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复,其机制可能与HIF-1α/VEGF信号通路的激活有关。
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