为查明贵州省平坝区某养殖场牛发病死亡的原因,采集病死牛的肺脏组织进行病原分离培养、实时荧光定量PCR鉴定、普通PCR扩增及基因测序分析。结果:在改良Frey氏固体培养基表面生长出“煎蛋”样菌落;实时荧光定量PCR检测结果为支原体感染阳性;普通PCR扩增及基因测序,分离菌株与各牛支原体参考株的同源性均高达95.6%,且处于同一进化分支。结论:综合诊断发病牛为牛支原体感染。