E型牛肠道病毒新疆BL311株的分离鉴定及致病性分析

作者：陈俊贞; 李祯; 张成远; 袁圆圆; 张乐乐; 付强; 史慧君

来源：中国动物传染病学报, 2022, 1-11.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220707.004

• 牛肠道病毒
• 分离鉴定
• 全基因组序列
• 致病性

以采集自新疆博乐某牛场腹泻牛的粪便，接种胎牛肾细胞（MDBK），盲传15代分离牛肠道病毒（BEV），使用蚀斑纯化法连续纯化5轮得到纯化病毒，并命名为BL311。使用BL311株感染MDBK细胞后，观察细胞病变效应（CPE），采用Reed-Muench法计算病毒滴度，利用理化性质检测、透射电镜观察、基因型分析及对小鼠的致病性试验鉴定BL311分离株。结果显示，BL311分离株感染MDBK细胞24 h后细胞出现变圆、破裂和脱落等致细胞病变效应，病毒滴度显著增高（P＜0.05）；36 h后细胞出现大量CPE，病毒滴度极显著增高（P＜0.01）。理化性质鉴定结果显示BL311分离株对有机溶剂具有一定抵抗力，紫外光照射1 h或56℃环境培养1 h可使毒株失活。电镜下观察BL311毒株为直径25～30 nm的球形颗粒，具有典型的小RNA病毒粒子形态。基因测序结果显示BL311毒株的基因全长是7514 nt，与国内报道的HY12分离株（KF748290）的同源性高达99%，属于BEV-E3型。致病性实验结果显示，BALB/c小鼠感染BL311毒株后，器官表现为肿大，且伴有出血；病理组织学观察可见组织器官炎性细胞浸润及出血。本研究分离纯化得到一株具有较强致病性的E种肠道病毒，将为新疆BEV的流行病学调查及致病机制研究提供依据。

• 单位
  新疆农业大学