腺苷A3受体对浅筋膜成纤维细胞cAMP/Epac信号通路及炎症因子表达的影响

作者：崔艳茹; 许经萍; 可红; 席超; 徐尚呈; 杜红; 屈飞^*

来源：中国现代医学杂志, 2023, 33(24): 36-42.

• 腺苷A3受体
• 针刺镇痛
• 浅筋膜
• 成纤维细胞
• cAMP/Epac通路

目的 探讨沉默腺苷A3受体对浅筋膜成纤维细胞cAMP/Epac信号通路及炎症因子表达的影响。方法 选取SD大鼠浅筋膜组织，通过组织块培养法提取成纤维细胞，细胞免疫荧光实验检测Vimentin、CD45、FⅧ、AKA表达，腺苷预处理细胞并分为Control组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、10μmol/L组和100μmol/L组，均培养48 h。腺苷siRNA干扰实验将细胞分为对照组、腺苷组、A3R干扰组、空载组。对照组不予任何处理，腺苷组用10μmol/L腺苷培养48 h，其余两组用2μL Lipofectamine 2000转染A3R siRNA，在培养箱孵育6 h后换上维持液继续培养48 h。Western blotting检测细胞腺苷A3受体蛋白的表达，实时荧光定量聚合酶链反应检测cAMP、Epac mRNA表达，Western blotting检测cAMP、Epac蛋白表达，酶联免疫吸附试验检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，免疫荧光检测细胞间黏附分子-1表达。结果 Control组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、10μmol/L组和100μmol/L组A3R蛋白相对表达量比较，差异有统计学意义（P <0.05），腺苷预处理可剂量依赖性地上调A3R蛋白表达。对照组、腺苷组、A3R干扰组、空载组A3R蛋白相对表达量比较，差异有统计学意义（P <0.05），腺苷siRNA干扰可下调A3R蛋白表达，而空载组并无明显影响。A3R干扰组cAMP、Epac m RNA相对表达量高于对照组（P <0.05）。A3R干扰组cAMP、Epac蛋白相对表达量高于对照组（P <0.05）。A3R干扰组IL-6、TNF-α相对表达量高于对照组（P <0.05）。结论 在浅筋膜成纤维细胞中，腺苷A3受体通过下调cAMP/Epac信号通路减少炎症因子的表达。

• 单位
  江西中医药大学