层粘连蛋白γ1基因沉默对膀胱癌细胞增殖及细胞周期的影响

作者：李彬琦; 李文明^*

来源：中国医药导报, 2023, 20(30): 18-23.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.30.03

• 层粘连蛋白γ1
• 基因表达调控
• 膀胱肿瘤
• 细胞增殖
• 细胞周期

目的 探讨层粘连蛋白γ1(LAMC1)在膀胱癌细胞中的表达情况，以及沉默LAMC1基因表达对膀胱癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法 选取河北省邯郸市中心医院2019年1月至2021年12月收治的48例膀胱癌患者的癌及癌旁组织。采用RT-qPCR法检测UMUC3、T24、5637及J82细胞中LAMC1的m RNA表达水平。将LAMC1-si RNA质粒转染至5637细胞中，设置LAMC1沉默组和阴性对照组，RT-qPCR和Western blot验证转染效率；采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术检测LAMC1基因沉默对膀胱癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响，Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin D1、p16和p21的表达水平。结果 5637细胞中LAMC1 m RNA表达水平较UMUC3、T24、J82细胞高（P<0.05）。癌旁组织与膀胱癌组织中LAMC1阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。LAMC1沉默组中LAMC1 m RNA和蛋白表达水平低于阴性对照组（P<0.01）。LAMC1沉默组中细胞增殖活力和克隆形成能力低于阴性对照组（P<0.01）。LAMC1沉默组中细胞中S期细胞所占百分比低于阴性对照组（P<0.01）,G1期细胞所占百分比高于阴性对照组（P<0.01）。LAMC1沉默组中的cyclin D1和cyclin A蛋白的表达水平低于阴性对照组（P<0.01），而p16和p21蛋白的表达水平高于阴性对照组（P<0.01）。结论 沉默LAMC1基因表达能够抑制细胞周期相关蛋白的表达从而抑制膀胱癌5637细胞增殖能力，提示其可能是膀胱癌潜在的治疗靶点。

• 单位
  邯郸市中心医院