转录因子Snail及Slug在转化生长因子-β2诱导的人晶状体上皮细胞间质转分化中的表达

作者：王颖娜; 裴澄^*; 秦莉; 李晶明; 易敬林; 陈丽

来源：中华眼科杂志, 2016, 52(04): 285-290.

• 晶体
• 上皮细胞
• 上皮-间质转化
• 转录因子
• 转化生长因子β2

目的探讨转录因子Snail及Slug在转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导的体外培养人晶状体上皮细胞(HLEC)上皮间质转分化(EMT)中的表达。方法实验研究。采用不同浓度的TGF-β2作用于HLEC一定时间后, 倒置荧光显微镜观察细胞形态变化;免疫荧光法观察转录因子Snail及Slug细胞内的表达及分布情况;Western blot测定Snail, Slug, E-cadherin及α-SMA蛋白的表达水平。实验结果采用单因素方差分析、秩和检验及Pearson相关性检验。结果体外培养的HLEC呈多角形单层细胞, 细胞间粘连紧密, 呈片状分布, 加入不同浓度TGF-β2继续培养24 h后, 细胞转变为长梭形类成纤维细胞样形态, 并移行为单个细胞分布;免疫荧光提示Snail及Slug蛋白的表达位于细胞核;TGF-β2诱导Snail及Slug的表达呈现时间和浓度依赖性, 不同浓度(0.1、1.0、10.0 μg/L)的TGF-β2处理HLEC 24 h后, 各实验组Snail(0.74±0.16、1.13±0.03、1.54±0.18)、Slug (1.96±0.02、3.12±0.09、4.07±0.12)、α-SMA (0.87±0.04、1.42±0.11、2.17±0.36)和E-Cadherin (2.50±0.36、1.65±0.32、0.41±0.14)蛋白及对照组的表达差异有统计学意义(χ2=9.62 , P=0.02 ;F=241.10 , P<0.01 ;χ2=9.97 , P=0.02 ;F=19.99 , P<0.01), 并且Snail、Slug分别与α-SMA和E-Cadherin的表达变化呈现高度相关性(相关系数均接近1, P<0.01)。用1 μg/L的TGF-β2处理HLEC不同时间(8、24、48、72 h)后发现8 h即有Snail和Slug蛋白的表达上调, 24 h表达量上调明显, 48 h表达最高, 72 h表达量开始下降。各实验组Snail蛋白(0.90±0.13、1.43±0.14、1.96±0.27、1.57±0.16)和Slug蛋白(0.91±0.36、1.24±0.16、2.44±0.26、1.43±0.16)的表达及对照组差异有统计学意义(F=12.49 , P=0.001;F=14.03 , P<0.01)。结论转录因子Snail及Slug可能参与TGF-β2诱导的体外HLEC的EMT过程, 且呈浓度与时间依赖性。(中华眼科杂志, 2016, 52:285-290)

• 单位
  南昌大学附属眼科医院; 西安交通大学第一附属医院