摘要

构建了间充质干细胞外泌体-温敏水凝胶系统并考察其在表皮创伤修复中的作用。首先采用差速离心法提取分离了间充质干细胞外泌体,透射电镜表征结果显示其呈完整球形。再通过单因素和正交试验优化温敏壳聚糖水凝胶的处方。优化的空白处方为:壳聚糖2%,β-甘油磷酸二钠40%,碳酸氢钠0.4 mol/L。验证试验表明,3批制品在37 ℃下的凝胶时间为(9.6±1.2)min,凝胶温度为(34.1±1.3)℃,具有良好的温敏性。荧光标记法显示,外泌体在温敏凝胶中均匀分散,且该载药凝胶在大鼠表皮上可滞留3 d以上。体外释放试验表明,相对于游离外泌体,载药凝胶中的外泌体具有缓释特征,7 d累积释放率为(79.6±4.0)%。在体外细胞增殖试验中,经外泌体-温敏水凝胶处理的大鼠成纤维细胞d5的增殖率达(387.7±26.6)%,约为磷酸盐缓冲液和游离外泌体组的1.9和1.2倍,提示该间充质干细胞外泌体-温敏水凝胶在表皮创伤修复方面具有良好的应用前景。

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