喉癌Hep-2细胞来源的exosomes的发现和鉴定

作者：吉晓滨; 梁俊毅; 刘启才; 谢景华

来源：现代肿瘤医学, 2015, 23(23): 3387-3390.

• 喉癌细胞
• Exosome Isolation Kit
• 超滤离心
• exosomes
• 透射电子显微镜

目的:观察喉癌Hep-2细胞可否分泌exosomes,并从形态学角度鉴定。方法:大量培养喉癌Hep-2细胞,热休克处理,收集培养上清。先通过3/0.8μm深层过滤小型滤芯对上清进行预处理,去除直径较大的颗粒和杂质。采用Exosome Isolation Kit(商品化试剂盒)收集培养上清液4ml,依次加入Exosome Isolation Kit内试剂,通过exosomes提取专用过滤柱,收集浓缩液。用高倍透射电子显微镜对exosomes做鉴定。结果:成功从喉癌Hep-2细胞培养上清中分离提取出exosomes,电镜观察见exosomes呈圆形或椭圆形双层膜的囊泡状结构,直径约20100nm,密度较高,分散均匀。结论:首次发现喉癌细胞自身能分泌exosomes,为喉癌免疫治疗做出新的探求。

• 单位
  广州医科大学; 广州市第一人民医院