蓝莓ISSR-PCR反应体系建立与优化

作者：李广平; 柴梦颖; 张长青

来源：西北农业学报, 2010, 19(12): 134-137.

DOI：10.3969/j.issn.1004-1389.2010.12.026

• 蓝莓
• ISSR
• 反应体系
• 优化 Blueberry
• ISSR
• ISSR reaction system
• Optimization

以蓝莓为材料,通过正交试验设计和单因子优化试验对影响ISSR-PCR扩增结果的5个因素进行探讨,建立了适合蓝莓ISSR-PCR分析的反应体系和扩增程序,即在50μL反应总体积中,包含模板DNA20 ng、ISSR引物0.4μmol.L-1、dNTPs 0.15 mmol.L-1、Mg2 1.5 mmol.L-1、1.25 UTaqDNA聚合酶和10×buffer 5.0μL。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,47℃退火30 s,72℃延伸1 min,30个循环;72℃延伸7 min。该体系的建立为利用ISSR标记进行蓝莓遗传分析奠定了基础。

• 单位
  河南农业职业学院; 金陵科技学院; 南京林业大学