GPR35致主动脉夹层的分子机制研究

作者：宋志平; 唐名扬; 侯娟妮; 沈阳; 冯娟; 冯健; 杨大春; 裴海峰^*; 杨永健^*

来源：解放军医学杂志, 2019, 44(05): 375-381.

• 主动脉夹层
• G蛋白偶联受体35
• 炎症
• 细胞凋亡

目的探讨G蛋白偶联受体35(GPR35)在主动脉夹层(AD)发生发展中的作用及机制。方法将30只野生型(WT)雄性小鼠随机均分为WT+Sham组和WT+AD组,15只GPR35基因敲除(GPR35-/-)小鼠纳入GPR35-/-+AD组,建立AD模型:WT+AD组和GPR35-/-+AD组使用血管紧张素Ⅱ[4.5 mg/(kg·24 h)]微型渗透泵埋于小鼠背部皮下,WT+Sham组使用等量生理盐水,术后14d主动脉取材。将小鼠主动脉平滑肌细胞系(MOVAS)分为3组:对照组、AD组及GPR35抑制剂组(CID组)。采用q-PCR及Western blotting检测主动脉和MOVAS细胞中GPR35的表达;采用HE染色和VVG染色检测主动脉夹层形成和弹力纤维结构情况;采用免疫组化和q-PCR检测主动脉内单核巨噬细胞(CD68阳性细胞)浸润及炎性因子白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平;采用TUNEL染色和流式技术检测主动脉平滑肌细胞凋亡情况。结果与WT+Sham组相比,WT+AD组GPR35 mRNA表达水平升高(1.88±0.07)倍,GPR35蛋白表达水平升高(1.34±0.05)倍,在细胞模型中亦得到类似结果;与WT+AD组小鼠的AD发生率(53.3%)相比,GPR35-/-+AD组小鼠AD发生率(13.3%)明显降低(P<0.05);与WT+AD组相比,GPR35-/-+AD组的主动脉扩张和中层增厚情况明显减轻,弹性纤维结构排列也较规则;WT+AD组小鼠CD68阳性细胞率高于WT+Sham组和GPR35-/-+AD组[(32.8±1.1)%vs.(5.1±0.9)%vs.(16.0±1.1)%],差异有统计学意义(P<0.05)。WT+AD组的IL-6、TNF-αmRNA表达水平(2.6±0.1、1.8±0.1)均明显高于WT+Sham组(均为1.00±0.06),GPR35-/-+AD组的IL-6、TNF-αmRNA表达水平(1.6±0.1、1.4±0.1)均明显低于WT+AD组,差异均有统计学意义(P<0.05)。WT+AD组凋亡细胞数明显高于WT+Sham组和GPR35-/-+AD组[(24.0±0.7)%vs.(6.6±0.5)%vs.(11.2±0.9)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。AD组的MOVAS凋亡率高于对照组和CID组[(11.6±0.5)%vs.(4.7±0.4)%vs.(7.6±0.4)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制GPR35可通过阻止主动脉炎症和平滑肌凋亡来发挥预防主动脉夹层生成的作用。

• 单位
  川北医学院