建立九色流式检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡方案

作者：黄巧容; 温博; 李雪; 胡莲; 万雪梅; 曾升平; 孟文彤

来源：四川大学学报（医学版）, 2016, 47(02): 262-266.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2016.02.026

• 九色流式
• T细胞亚群
• TCR Vβ
• 活化
• 凋亡

目的建立九色流式方法检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡状态的方案。方法用细胞膜表面抗体CD3、CD4、CD8、CD95、CD69、磷脂结合蛋白Annexin-Ⅴ、TCR Vβ抗体试剂盒和细胞核染料DAPI建立九色流式染色方案。用1例健康成年人外周血标本分别进行抗体滴度实验、最适检测电压选择、单色染色和缺一色染色,确定条件后,对8例健康成年人外周血标本进行检测分析。结果根据细胞分群情况选择了合适的抗体滴度和检测电压,单色染色和缺一色试验确定了适宜补偿,建立了九色流式检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡状态的方案;采用此方案检测的8例健康成年人标本,TCR Vβ亚群分布与TCR Vβ抗体试剂盒说明书及文献报道分布一致,并能分析各TCR Vβ亚群细胞活化及凋亡状态。结论建立的九色流式方案可检测人外周血中TCR Vβ淋巴细胞亚群活化及凋亡状态,操作简便,结果可靠。

• 单位
  四川大学华西医院; 成都中医药大学附属医院; 成都中医药大学