一种无外源菌DNA污染的鸡球虫卵囊的制备方法

作者：龚振兴; 刘保红; 马雪婷; 殷昊; 李法财; 蔡建平^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2020, (05): 108-151.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.04.0493

• 鸡球虫
• 卵囊
• 制备
• 基因组DNA
• 外源菌DNA

为了获得无鸡肠道和粪便细菌DNA污染的鸡球虫卵囊,试验采用实验室制备的无微生物污染的水配制相关试剂,对柔嫩艾美耳球虫卵囊采用漂浮纯化、灭菌处理和外源菌DNA去除等方法,获得高纯度的柔嫩艾美耳球虫卵囊;提取卵囊的基因组DNA,用细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增并进行序列分析,以鉴定该卵囊是否被外源菌DNA污染。结果表明:提取的柔嫩艾美耳球虫卵囊基因组DNA经PCR方法检测外源DNA呈阴性。说明用此方法制备的柔嫩艾美耳球虫卵囊无外源菌DNA污染,可用于制备高纯度的无外源菌DNA污染的鸡球虫卵囊。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所