同步扩增和鉴定中国人群 KIR基因有无的PCR-SSP方法的建立

作者：邓志辉^*; 甄建新; 张耿; 杨智超; 喻琼; 陈浩

来源：中华医学遗传学杂志, 2023, 40(07).

• 杀伤细胞免疫球蛋白样受体
• 序列特异性引物-聚合酶链反应
• KIR基因

目的探讨建立同步扩增中国人群全部KIR基因和鉴定KIR基因有无的序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法。方法选取2015年1月至2015年11月在深圳市血液中心无偿献血的132份健康受试者的血样为研究对象。基于中国人群精细水平KIR等位基因的多态性和单核苷酸多态性(SNP)信息, 参考IPD-KIR数据库, 设计KIR基因特异性引物用于扩增16种KIR基因及2DS4-Normal、2DS4-Deleted 2种亚型;并采用KIR基因型已知样本, 对每对PCR引物的特异性进行验证。在KIR基因的PCR扩增反应中, 复合扩增人体生长激素(HGH)基因片段作为内对照, 以防止PCR扩增出现假阴性结果。随机选取132份KIR基因型已知的健康受试者DNA样本进行盲检, 验证该方法的可靠性。结果本研究设计和筛选出的KIR特异性引物, 可鉴定相应的KIR基因, 而且内对照条带和特异性扩增条带均清晰、明亮;采用本研究建立的鉴定KIR基因有无的PCR-SSP方法检测纳入研究的132份样本的盲检结果, 与已知KIR基因型完全一致。结论本实验建立的KIR PCR-SSP方法, 鉴定中国人群KIR基因的有无可获得准确、可靠的结果。

• 单位
  深圳市宝安区妇幼保健院; 中心实验室; 深圳市血液中心