摘要

目的:探讨赤芍-附片对慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠的保护作用及其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法:48只SD大鼠随机分为空白组(6只)和ACLF造模组(42只)。ACLF造模组大鼠用牛血清白蛋白皮下及尾静脉注射联合腹腔注射D-氨基半乳糖+脂多糖制备ACLF大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组,各组大鼠予相应药物干预1周。检测肝功能、凝血酶原时间(PT),ELISA法检测肝组织白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),HE染色观察大鼠肝组织病理改变,Western blotting法检测肝组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT(Ser473)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR技术检测PI3K mRNA、AKT mRNA表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠肝组织出现肝细胞形态变化,呈融合性坏死、点状或灶状坏死,纤维组织增生,汇管区见大量炎症细胞浸润;与模型组比较,阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组大鼠肝组织肝细胞排列相对整齐,坏死程度改善,纤维组织减少,炎症细胞浸润减少。模型组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于空白组(P<0.05),肝组织中p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均低于空白组(P<0.05)。阳性组、赤芍组、附片组、赤芍-附片组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于模型组(P<0.05),肝组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均高于模型组(P<0.05);且赤芍-附片组大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA、PT水平及肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于阳性组、赤芍组、附片组(P<0.05),肝组织p-PI3K、p-AKT蛋白相对表达量及PI3K mRNA、AKT mRNA相对表达量均高于阳性组、赤芍组、附片组(P<0.05);各组大鼠PI3K、AKT蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:赤芍-附片可能通过调节PI3K/AKT信号通路,下调相关炎症因子的表达,以减轻ACLF大鼠免疫炎症反应,从而发挥对肝脏的保护作用。

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