猪IL-2基因真核表达载体的构建及在酵母中的表达

作者：张巧颖; 景志忠; 栗震亚; 陈国华

来源：中国兽医科学, 2006, (04): 315-319.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2006.04.014

• 白细胞介素-2
• 基因
• 毕赤酵母
• 表达 IL-2
• gene
• Pichia pastoris
• expression

用真核表达引物从pGEM-IL-2重组质粒中扩增出猪IL-2基因,将目的基因和真核表达载体pPIC9K连接转入E.coli的JM109中,得到了猪pPIC9K-IL-2重组表达质粒。通过电激法将经SalⅠ酶切线性化的pPIC9K-IL-2质粒转化到巴斯德毕赤酵母GS115感受态细胞中,利用甲醇诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,表明在摇床水平及发酵罐中均表达出约17 ku大小的分泌性目的蛋白,采用Sephadex G-100分子筛层析对其表达产物进行纯化,纯化结果理想。

• 单位
  兰州大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 生命科学学院