AP2α荧光素酶报告基因的构建及在BMPs诱导成骨分化研究中的应用

作者：龚梦嘉; 周建武; 毕杨

来源：南方医科大学学报, 2013, (11): 1571-1576.

• 转录蛋白AP2α
• 荧光素酶报告基因
• 显性负性突变体
• 骨形态发生蛋白 activator protein 2α
• luciferase reporter gene
• dominant negative mutants
• bone morphogenetic protein

目的构建一种携带转录蛋白AP2α效应元件的荧光素酶报告基因载体,并应用于筛选BMPs对AP2α转录活性的影响。方法设计4个串联的AP2α效应元件(AP2α-RE),将其克隆至经Bam HⅠ和MluⅠ双酶切的pBGLuc荧光素酶报告基因质粒构建pBGLuc-AP2α-RE载体。重组腺病毒Ad-AP2α及其两种显性负性突变体Ad-dnAP2α感染小鼠间充质干细胞C3H10,通过Realtime PCR、Western blot检测AP2α的mRNA和蛋白水平表达,EMSA检测AP2α的DNA结合能力。pBGLuc-AP2α-RE转染C3H10细胞,荧光素酶报告基因检测同上各组AP2α的转录活性。A...

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院