摘要
目的对比6-姜酚在正常和低氧、低糖模式下对于人肝癌细胞株(HepG-2)细胞的杀伤和化疗增敏作用。方法通过浓度为5、10、15、20、40、60 mg/L阿霉素(多粱比星,Ad)M)和25、50、100、200μmol/L 6-姜酚刺激培养至对数期的HepG-2细胞,采用CCK-8试剂盒检测HepG-2细胞增殖反应。通过流式细胞术结合细胞凋亡检测试剂盒双标染色法检测药物作用后细胞的凋亡情况。采用实时聚合酶链式反应(real-time PCR)检测bcl-2、bax及birc-5 mRNA的表达情况。结果 6-姜酚、ADM作用于HepG-2细胞后,细胞生长受到抑制。两种模式下6-姜酚组、阿霉素组的抑制率随浓度的升高而增强,抑制率具有浓度依赖性。正常培养条件下对照组、6-姜酚组、ADM组及6-姜酚+ADM组HepG-2细胞凋亡百分比分别为(7.98±0.76)%、(9.63±1.00)%、(12.70±2.13)%、(19.92±1.41)%;低氧低糖条件下对照组、6-姜酚组、ADM组及6-姜酚+ADM组HepG-2细胞凋亡百分比分别为(13.92±2.02)%、(19.36±1.22)%、(27.87±0.99)%、(38.63±2.25)%,两种培养条件下各浓度组细胞凋亡百分比均较对照组增高,差异有统计学意义(£值分别为7.250、5.259、12.185、8.140、15.000、47.576,P值分别为0.019、0.034、0.007、0.015、0.004、0.000),两药联用组的凋亡数最高,且低氧、低糖各浓度组的凋亡数高于正常培养各浓度组。real-time PCR检测结果表明,正常培养条件下与对照组比较,实验组bcl-2、birc-5表达降低,bax表达无变化。低氧低糖条件下与对照组比较实验组bcl-2、birc-5表达降低,bax表达增高。在低氧低糖环境下bcl-2的表达较正常培养条件下的表达增高,而bax、birc-5表达减少,bcl-2/bax高于正常培养组。结论 6-姜酚可能通过下调birc-5的表达,降低Survivin蛋白抑制肿瘤细胞的凋亡的能力对HepG-2细胞产生杀伤和化疗增敏作用,在低氧低糖环境中这种作用表现地更为明显。
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单位山东大学齐鲁医院