美洲大蠊粉酶解工艺最佳用酶初步筛选

作者：刘颖; 王彦多; 曹广超; 施东方; 吕迎兰; 毕经会; 王**; 李静^*

来源：西部中医药, 2019, 32(09): 21-24.

• 美洲大蠊粉
• 蛋白酶
• 水解度
• MTT法
• 乳腺癌MCF-7细胞

目的:分别用4种蛋白酶对美洲大蠊粉超声提取液基于半仿生环境进行酶解,制备不同类型多肽,并采用MTT法筛选出抑制乳腺癌MCF-7细胞的最佳用酶。方法:分别用胃蛋白酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶对美洲大蠊粉进行酶解,采用苯并戊三酮显色法和半微量凯氏定氮法测定不同酶解液的水解度;使用MTT法进行体外抗肿瘤实验。以乳腺癌MCF-7细胞的抑制率为指标,水解度为参考,评价4种蛋白酶对美洲大蠊粉的酶解效果并筛选出最佳用酶。结果:胃蛋白酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对美洲大蠊粉的水解度分别为3.35%、13.30%、12.89%、7.74%。无酶对照组、胰蛋白酶组、胰凝乳蛋白酶组IC50依次为1.396、0.724、0.402 mg/mL;胃蛋白酶和弹性蛋白酶组因抑制效果不稳定而舍去。结论:在综合酶解能力和抑瘤能力方面,胰蛋白酶为美洲大蠊粉酶解工艺的最佳用酶,胰凝乳蛋白酶次之。

• 单位
  山东中医药大学