摘要
目的探讨Notch信号通路在调控成年小鼠脊髓来源神经干祖细胞(sp NSPCs)分化中的作用及其机制。方法分离和原代培养成年小鼠sp NSPCs,将sp NSPCs分为对照组和DAPT组,贴壁培养sp NSPCs并采用定向培养基进行分化,用神经元和星形胶质细胞的标志物对两组sp NSPCs进行免疫荧光染色,并统计神经元和星形胶质细胞分化比例。用免疫细胞荧光染色观察Notch1和转录激活因子5(ATF5)共表达的情况,免疫印迹和实时定量PCR法分析ATF5蛋白和mRNA表达情况。结果成功分离成年小鼠sp NSPCs,其表达神经干细胞标志物Nestin,并且具有向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能。与对照组对比,DAPT组神经元标志物Tuj1的阳性比例从8. 6%上升到23. 3%(P <0. 05),而星形胶质细胞标志物GFAP的阳性比例从65. 7%下降到42. 1%(P <0. 05)。Notch受体与ATF5共表达,DAPT组Notch1胞内段的表达较对照组下降了26%(P <0. 05),ATF5蛋白水平上升了60%(P <0. 05),mRNA水平上升了108%(P <0. 05)。结论 Notch信号通路可能通过ATF5调控脊髓神经干祖细胞分化。
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