‘南通小方柿’cDNA文库构建及DkGA2ox2调控因子的筛选

作者：叶夏林; 曹丽芳; 董雨菡; 侯应军; 渠慎春^*

来源：分子植物育种, 2022, 20(21): 7082-7090.

DOI：10.13271/j.mpb.020.007082

• DkGA2ox2
• HiTAIL-PCR
• Gateway技术
• cDNA文库
• 酵母单杂

本研究利用酵母单杂技术筛选DkGA2ox2基因上游转录因子，为进一步研究其表达调控机制提供理论基础。利用HiTAIL-PCR技术获得启动子序列，连入诱饵载体，转化进诱饵菌株。利用Gateway技术构建‘南通小方柿’cDNA文库，再共转化诱饵菌株，筛选得到转录因子。通过HiTAIL-PCR共获得1 205 bp启动子序列。构建的文库库容为1.4×107，插入片段大小在750～2 000 bp间，重组率100%。初步筛选出HB蛋白、FLL3蛋白和EIN3/EIL1蛋白3个候选蛋白，为探索DkGA2ox2基因上游调控机制提供了理论支撑。

• 单位
  南京农业大学