多拷贝异种化前列腺干细胞抗原融合基因片段的构建及真核表达

作者：韩刚; 阎瑾琦; 高江平; 贾锐; 张亮; 董金凯; 田仁礼; 王晓雄; 李韧; 于继云

来源：生物技术通讯, 2009, (02): 147-150.

• 前列腺肿瘤
• 前列腺干细胞抗原
• DNA疫苗
• 真核表达 prostate neoplasm
• prostate stem cell antigen
• DNA vaccine
• eukaryotic expression

目的:构建一系列含有人前列腺干细胞抗原(PSCA)主要T细胞表位的多拷贝异种化融合基因片段,并分别在人胚肾293T细胞中表达。方法:通过重叠延伸PCR法合成单拷贝异种化PSCA基因片段PSCA1,随即应用同尾酶法将该片段串联形成2、3、4拷贝异种化PSCA基因片段PSCA2、PSCA3和PSCA4,并将上述4种基因片段分别插入真核表达载体pCI-Fc-GPI中,构建最终目的片段1～4拷贝异种化PSCA-Fc-GPI(即PSCA1-Fc-GPI～PSCA4-Fc-GPI),随即分别将重组质粒pCI-PSCA1-Fc-GPI～PSCA4-Fc-GPI体外转染293T细胞,利用间接免疫荧光和流式细胞...

• 单位
  中国人民武装警察部队总医院; 军事医学科学院基础医学研究所; 中国人民解放军总医院