摘要
目的 探究桃红四物汤对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的保护作用及潜在的分子机制。方法 (1)取hRMECs,设置5组:空白对照组加5 mmol/L葡萄糖培养,高糖模型组加30 mmol/L葡萄糖培养,桃红四物汤低、中、高剂量组分别加30 mmol/L葡萄糖和相应浓度桃红四物汤含药血清培养,通过Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力,血管生成实验检测细胞的成管能力,ELISA试剂盒检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)水平,Western blot法检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达情况。(2)另外设置4组:空白对照组加5 mmol/L葡萄糖培养,高糖模型组加30 mmol/L葡萄糖培养,桃红四物汤组加30 mmol/L葡萄糖和高剂量桃红四物汤含药血清培养,桃红四物汤+HIF-1α过表达组采用HIF-1α过表达的hRMECs细胞加30 mmol/L葡萄糖和高剂量桃红四物汤含药血清培养,考察HIF-1α过表达对桃红四物汤的功能回复作用。结果 (1)与空白对照组比较,高糖模型组细胞侵袭和迁移能力均明显增强(P均<0.05),成管数量明显增多(P<0.05),VEGF水平和HIF-1α蛋白相对表达量均明显增加(P均<0.05)。与高糖模型组比较,桃红四物汤高剂量组细胞的侵袭和迁移能力均明显降低(P均<0.05),成管数量明显减少(P均<0.05),VEGF水平和HIF-1α蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。(2)与高糖模型组比较,桃红四物汤组细胞的侵袭和迁移能力均明显降低(P均<0.05),成管数量明显减少(P均<0.05),VEGF水平和HIF-1α蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);与桃红四物汤组比较,桃红四物汤+HIF-1α过表达组细胞侵袭和迁移能力均明显增强(P均<0.05),VEGF水平和HIF-1α蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论 桃红四物汤通过下调HIF-1α的表达减轻糖尿病视网膜病变引起的细胞损伤。
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单位上海中医药大学; 上海中医药大学附属曙光医院