摘要

目的:探究长链非编码RNA LINC01296调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路对卵巢癌顺铂耐药的影响。方法:培养人卵巢癌SKOV3细胞及SKOV3顺铂耐药SKOV3/DDP细胞,qRT-PCR检测LINC01296在二者中的表达情况;将SKOV3/DDP细胞分为5组:Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01296组(转染si-LINC01296)、si-NC+LiCl组(转染si-NC+Wnt/β-catenin通路激动剂LiCl 10 mmol/L处理)、si-LINC01296+LiCl组(转染si-LINC01296+10 mmol/L LiCl处理),qRT-PCR验证转染效果;CCK-8法检测各组SKOV3/DDP细胞顺铂半数抑制浓度(IC50)(0、1、2、4、8、16、32μg/mL顺铂处理)及增殖活力;流式细胞术检测各组SKOV3/DDP细胞凋亡;划痕愈合实验检测各组SKOV3/DDP细胞迁移能力;Western Blot检测各组SKOV3/DDP细胞中Wnt/β-catenin通路及增殖、凋亡、迁移、侵袭相关蛋白[Ki67;B细胞淋巴瘤/白血病基因-2相关X蛋白基因(Bax);基质金属蛋白酶9(MMP9);神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)]表达情况。结果:LINC01296在SKOV3/DDP细胞中的表达水平明显高于SKOV3细胞(P<0.05);SKOV3/DDP细胞转染si-LINC01296后,LINC01296表达水平较Control组、si-NC组明显下降(P<0.05),表明转染成功;与Control组比较,si-LINC01296组SKOV3/DDP细胞顺铂IC50、增殖活力、细胞划痕愈合率、侵袭数均下降,凋亡率增高,β-catenin、Ki67、MMP9、N-cadherin蛋白表达均减少,Bax蛋白表达增加(P<0.05);与si-LINC01296组比较,si-LINC01296+LiCl组SKOV3/DDP细胞顺铂IC50、增殖活力、细胞划痕愈合率、侵袭数均增高,凋亡率下降,β-catenin、Ki67、MMP9、N-cadherin蛋白表达均增高,Bax蛋白表达下降(P<0.05)。结论:敲低LINC01296表达可降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性,可能通过抑制Wnt/β-catenin通路实现。