巴西橡胶树红根病菌DNA提取有效方法比较

作者：涂敏; 蔡海滨; 孙爱花; 胡彦师; 华玉伟; 黄华孙

来源：中国农学通报, 2013, 28(34): 12-16.

• 巴西橡胶树
• 红根病菌
• DNA提取
• CTAB改良法

旨在筛选适用于橡胶树红根病菌DNA提取的有效方法并评价其效果。利用CTAB改良法、氯化苄改良法、SDS改良法等3种方法提取橡胶树红根病菌菌丝体DNA,并通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳对DNA样品进行检测,比较提取DNA的产量、质量;再选用提取效果最好的方法提取5个时间段(4、6、8、10、12天)的菌丝DNA并进行ITS-PCR检测。CTAB改良法提取的样品DNA纯度最好,产率最高,OD260/OD280为1.82～1.84,浓度可达280μg/mL;培养4～6天的菌丝提取的DNA质量最高,适合PCR检测需要。CTAB改良法是一种适用于橡胶树红根病菌DNA提取的理想方法。

• 单位
  农业部; 中国热带农业科学院橡胶研究所